Antecedentes y objetivos: La Fibulina-5 (FBLN5) es una proteína de matriz extracelular que modula la adhesión, motilidad y proliferación de las células endoteliales. Nuestro objetivo fue analizar si la FBLN5 interviene en la respuesta adaptativa de las células endoteliales a la hipoxia.
Métodos: Los estudios se desarrollaron en células endoteliales humanas de vena de cordón umbilical (HUVEC) y de aorta bovina (BAEC). El nivel de expresión se analizó mediante PCR a tiempo real y Western blot, y la actividad transcripcional en estudios de transfección transitoria. Se realizaron ensayos de retardo de la movilidad electroforética (EMSA) e inmunoprecipitación de cromatina (ChIP).
Resultados: La hipoxia incrementó el nivel de ARNm de la FBLN5 en las células endoteliales de forma tiempo dependiente. Este efecto fue bloqueado por inhibidores del eje PI3K/Akt/mTOR, mientras que DMOG, que previene la degradación de HIF-1α, indujo la expresión de FBLN5 de forma similar a la hipoxia. De hecho, el silenciamiento de HIF-1α previno el aumento de la expresión de FBLN5 observado en condiciones de hipoxia. Además, la hipoxia y la sobreexpresión de HIF1α aumentaron la actividad transcripcional de la FBLN5. Ensayos con delecciones seriadas del promotor indicaron la implicación de elementos situados en la región proximal y los análisis in silico identificaron un posible elemento de respuesta a hipoxia (HRE), cuya mutación previno el aumento de la actividad transcripcional provocada por la hipoxia. Asimismo, estudios de EMSA y ChIP demostraron que la hipoxia aumenta la unión de HIF-1 a esta secuencia.
Conclusiones: HIF-1 es responsable de la inducción por hipoxia de la FBLN5 en las células endoteliales. Nuestros resultados sugieren que la FBLN5 participa en la adaptación del endotelio vascular al estrés hipóxico.